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    大鼠軟骨細胞的制備方法一起來了解一下

    發布時間:2022-04-13 點擊量:252
           大鼠軟骨細胞是軟骨組織中的主要細胞成分。位于軟骨陷窩中。軟骨細胞的核小,呈圓形或橢圓形,有1至數個核仁,胞質略嗜堿性。細胞形狀依軟骨組織而異:在透明軟骨,靠近軟骨膜的細胞呈橢圓形,其長軸與軟骨表面平行,深部的細胞逐漸變為圓形或卵圓形,常常兩個或多個聚集成群,稱為同源細胞群;在彈性軟骨,細胞的形態基本上與透明軟骨的相似;在纖維軟骨,細胞略呈卵圓形,夾在膠原纖維束之間,單個存在、成對存在或排列成單行。
      大鼠軟骨細胞制備:
      1)大鼠關節軟骨細胞的取材、培養及細胞一般生物活性測定
      取4~5周齡,體重185~200g的SD大鼠,斷頸處死,置于5%CO2混和氣體環境中,37℃恒溫箱內單層培養,隔3d換液,8~10d達85%融合后進行傳代。
      2)倒置相差顯微鏡下形態學觀察
      取每代貼壁軟骨細胞于倒置相差顯微鏡觀察細胞生長情況。倒置相差顯微鏡觀察:原代軟骨細胞9~12h部分貼壁,大部分在24h時完成貼壁,部分細胞開始伸展,細胞體積較小,呈多角形,均勻散在生長,48h內基本上鋪展成三角或多角形;7~10d達到90%融合形成單層細胞,細胞仍呈多角形或短梭形,細胞排列緊密,折光性強。
      3)軟骨細胞透射電鏡觀察胰酶消化各代次軟骨細胞,離心后先于離心管培養3d,送福建醫大電鏡室制片觀察。經離心管培養3d后,固定標本進行電鏡技術觀察,原代P0培養軟骨細胞為卵圓形或圓形,細胞核清晰,較多異染色質分布于核膜邊緣和核內。
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