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    小鼠肝細胞的具體實驗方法一起來了解一下吧

    發布時間:2022-05-20 點擊量:216
           小鼠肝細胞通常指小鼠肝實質細胞。在動物體正常生理和病理條件下,肝臟在能量代謝、外源物質的生物轉化、基質蛋白的合成、解毒等方面發揮著其重要的作用。肝實質細胞是指具有肝功能的基本組成單位,大約占肝臟體積及數量的80%左右,肝實質細胞具有多方面的功能,例如:蛋白質的合成和儲存、分泌膽汁和解毒物質等。肝實質細胞體外常常被用作研究肝臟功能、能量代謝和肝臟疾病的良好模型
      小鼠肝細胞試驗方法:
      1.將小鼠斷頸致死,置75%酒精泡2-3秒鐘,取肝臟,置于盛有PBS的平皿中。
      2.剔除脂肪、結締組織、血液等雜物,轉移到另一個盛有PBS液的平皿中。
      2.3用手術剪將臟器剪成小塊(大小約1mm2),玻片研磨,轉到離心管,離心(1000rpm,5min)。
      4.視組織或細胞量加入5-6倍(3-5ml)胰酶,37℃中消化20分鐘,每隔5分鐘振蕩一次,或用吸管吹打一次,使細胞分離。
      5.加入3-5ml含血清的培養液以中止胰酶消化作用。
      6.用100目孔徑濾網濾過,除去未消化的大組織塊。
      7.再次離心5min,棄上清液。
      8.加入無血清培養液5ml,沖散細胞,再離心一次,棄上清液。
      9.加入含血清的培養液1-2ml(視細胞量),血球計數板計數。
      10.將細胞調整到5×105/ml左右,轉移至6孔培養板中,37℃下培養。
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