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    大鼠軟骨細胞制備時需使用哪些試劑?

    發布時間:2022-07-11 點擊量:184
      大鼠軟骨細胞分離自正常大鼠軟骨組織,軟骨細胞主要功能:軟骨是人身體中不會發生的組織;骨骼在發育初期大部分是由軟骨構成的;軟骨一般起到承重負荷,減少關節間骨骼摩擦等作用。
      
      前面我們講述過軟骨細胞的制備方法,但是在制備過程所使用的試劑有哪些,這你們知道嗎?我相信很多人都是不知道的。下面,欣潤生物就來詳細講述一二。
      
      大鼠軟骨細胞制備過程中主要的試劑:
      
      1、PBS:每袋加ddH2O定容至1000ml,調pH7.2,高壓滅菌消毒。
      
      2、DMEM細胞生長培養液:臨用前根據需要加10%胎牛血清,1%的ITS,按1%體積分數加入雙抗貯存液(青霉素+鏈霉素),使青霉素和鏈霉素的終濃度分別為100U/mL和100U/mL,置于4℃冰箱保存。
      
      3、抗生素:青霉素(80萬U)和鏈霉素(100萬U)在無菌操作臺內以高壓滅菌過的雙蒸水溶解(分別加入4ml滅菌水/青霉素,5ml滅菌水/鏈霉素),配制成20萬u/ml分裝,置于-20℃冰箱保存,臨用時4℃解凍。
      
      注意:盡量避免反復凍融,并使培養基濃度為100u/ml。
      
      4、細胞凍存液:生長培養基(含20%胎牛血清)或100%胎牛血清,加入10%的DMSO混合均勻,置于4℃冰箱保存。
      
      注意:大鼠軟骨細胞接種后48H再換液,這樣細胞才帖牢不掉。第三、四天多觀察,細胞在會爆發式增殖。
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