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    小鼠心肌細胞具體操作規程是這樣的

    發布時間:2022-06-23 點擊量:189
           小鼠心肌細胞根據其生理功能可分為兩類,即工作性心肌細胞和傳導性心肌細胞。其中工作性心肌細胞構成心房肌和心室肌,是心壁的主要組成部分,具有興奮、傳導和收縮的功能;而自律性心肌細胞組成心臟的傳導系統,包括竇房結、結間束、房室交界、左右束支和普肯耶纖維網。
      小鼠心肌細胞操作規程:
      一.培養基及培養凍存條件準備:
      1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
      2)培養條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
      3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
      二.細胞處理:
      1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
      2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
      對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
      方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
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